هتكلم
عن تجربه انك ازاى تعمل مضاد حيوى من الميكرو اورجانزمز
هنعزل الاول بكتريا من مصادر مختلفه
من مصادر مختلفه(شعر-جلد-بصاق-انف-اسنان-اذن-هواء -ماء-تربه) وتنميتها علي المديا المناسبه ثم استخراج منها مواد كميائيه ثم فصلها وتنقيتها عن طريق طرق
الكرموتوجراف
column chromatography
واختبارها كمضادات حيويه لبعض البكتريا الممرضه
pathogenic bacteria

بصورة مبسطة جدا
احنا بنحضر
مديا
N Agar
الصلبه
والسائله
اركن المديا السائله دلوقتى هنستخدمها في الاخر


وتركيب المديا

gm beef extract
3gm peptone
5 m Nacl
15-20 gm agar
1000 ml dis H2o

طبعا الاجار بيتحط في المديا الصلبه بس
اما السائله بيبقي مش فيها الاجار
بعد كدة
بنعزل
البكتريا من الشعر والجلد
والهوا والتربه والميه الخ

وننميها ونزرعها في المديا الصلبه
ونسيبها في الحضانه
incubator
لمدة يومين

بعد كدة
بنطلع المديات للي مزروع فيها البكتريا كلها

مثلا كنت عازل بكتريا من الشعر في طبق
فهنلاقي
كذا
او مستعمرة
colony

في طبق للي زارع فيه

فمثلا لقيت خمس مزارع في الطبق
بتاخد كل مزرعها تنميها
من اول تانى علي مديا صلبه
وتحطها في الحضانه
incubator
لمدة يومين

تطلع الاطباق كلها
هتلاقي كل طبق فيه مستعمرة واحدة بس
لو فيه اتنين هتعمل نفس العمله لغايه لما يبقي كل طبق فيه مستعمرة واحدة

بعد كدة بتاخد كل طبق

وتاخد منه جزء من السمتعمرة وتعمله صبغه جرام وتفحصة تحت الميكروسكوب

وبعده بتاخد جزء كمان من المستعمرة
وتحطة في المديا السائله للي انت حضرتها في الاول خالص
وبعدها تحطة في الحضانه
لمدة يومين
علي ما البكتريا تنمو وتطلع المركب للي عايز اشوفه ينفع مضاد حيوى ولا لاء

بعد اليومين
ما يخلصو تطلع البكتريا السائله
واركنها شويه


واروح احضر مديا صلبه تانى واجيب بكتريا ممرضه زى السلامونيلا او الكلبيسيلا او الشيجلا الخ
وازرعها في المديا الصلبه دى
واعمل دايرة صغيرة خالص في نص الطبق

وبعدها اخد المديا السائله
واصب واحد ملي في الدايرة او الحفرة للي عملتها في النص دى
دة كله في ظروف تعقيم طبعا

وبعدها ادخل الطبق دة في الحضانه لمدة يومين

وبعدها اطلعه

واشوف حوليين الدايرة او الحفرة للي عملتها
فيه
inhibition zone
ولا لاء
الانهبيشن زون دى
يعنى منطقه
مش فيها بكتريا نتيجة المادة للي مستخرجها دى

لو فيه يبقي المادة اللي مستخرجها دى تنفع كمضاد حيويى

طبعا بعدها بتروح تطير تعمل كذا حاجة
اولهم ان
المادة للي انت مستخرجها دى فيها كذا مادة بس انت عايز المضاد الحيوى بس
فبتعمل كرموتوجراف
وتفصل
المادة الفعاله بس

بعدها بتروح تعمل اختبار التوسوسيتى او السميه
عايز تشوف
المضاد الحيوى دة او المادة دى
لها تاثر سام ولا
عشان لو ملهاش يبقي
صالحة تماما للاستخدام الادمى

ود بيتم عن طريق ان فيه حيوان اولي
اسمه الارتيميا
ودة حساس جدا لاي سم
بمعنى انه
لو في فسوة
ههههههههه
فسوة سموم
بيموت
المهم بتحط
المادة للي انت مستخرجها دى
علي كميه كبيرة من الارتميا
للي بتبقي صغيرة جدا وفي كاس كبير
وبعد كدة بتفحصه وتشوفه
مات ولالاء
لو مش مات
يبقي مش سام
وبتتاكد من حكايه السميه دى
بكذا طجربه تانيه

المهم
فيه جزء بقي
مش بيتعمل وهو
انك بعد كدة
انت معاك المادة
او المضاد الحيوى للي انت استخلصته
انت عايز تعرفه تركيبه الكميائي ازاى
عليك وعلي الاسبكترا
االان ام ار
NMR
واليوفي
UV
والاي ار
IR
وودول اجهزة بتعرف
المجموعات الوظيفيه والذرات في االمادة للي معاك
وبيطلعلك شارت او رسم بيانى يعنى علي الجهاز
تقوم ترجع لمهامك ككميائي
وتترجم الشارت او الرسم البيانى دة
لمركب
وترسمه
ويبقي اشطة كدة
معاك المضاد الحيوى وتركيبه وكل حاجة

بقلم
د/ احمد
كميائي واخصائي تحاليل طبيه
وباحث في علم الميكروبيولوجى والمناعه